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液相色譜柱使用的注意事項(xiàng)

更新時(shí)間:2021-07-19  |  點(diǎn)擊率:1686
使用液相色譜柱做HPLC分析時(shí),通常會(huì)遇到一些問題,下面為大家介紹幾點(diǎn)液相色譜柱使用的注意事項(xiàng):
 
1、避免壓力和溫度的急劇變化及任何機(jī)械震動(dòng)
溫度的突然變化或者使色譜柱從高處掉下都會(huì)影響柱內(nèi)的填充狀況;柱壓的突然升高或降低也會(huì)沖動(dòng)柱內(nèi)填料,因此,在調(diào)節(jié)流速時(shí)應(yīng)該緩慢進(jìn)行,在閥進(jìn)樣時(shí)閥的轉(zhuǎn)動(dòng)不能過緩。
 
2、應(yīng)逐漸改變?nèi)軇┑慕M成
特別是反相色譜中,不應(yīng)直接從有機(jī)溶劑改變?yōu)槿渴撬?,反之亦然?/div>
 
3、一般說來色譜柱不能反沖
只有生產(chǎn)者指明該柱可以反沖時(shí),才可以反沖除去留在柱頭的雜質(zhì)。否則反沖會(huì)迅速降低柱效。
 
4、選擇使用適宜的流動(dòng)相(尤其是pH),以避免固定相被破壞。
有時(shí)可以在進(jìn)樣器前面連接一預(yù)柱,分析柱是鍵合硅膠時(shí),預(yù)柱為硅膠,可使流動(dòng)相在進(jìn)入分析柱之前預(yù)先被硅膠“飽和”,避免分析柱中的硅膠基質(zhì)被溶解。
 
5、經(jīng)常用強(qiáng)溶劑沖洗色譜柱,清除保留在柱內(nèi)的雜質(zhì)。
在進(jìn)行清洗時(shí),對(duì)流路系統(tǒng)中流動(dòng)相的置換應(yīng)以相混溶的溶劑逐漸過渡,每種流動(dòng)相的體積應(yīng)是柱體積的20倍左右。
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